Ako môžem izolovať baktérie z pôdy ?

Pôda je bohatým zdrojom mnohých rôznych druhov baktérií . Baktérie pomoc pri kompostovaní rastlinného a živočíšneho organického materiálu , pri stanovení anorganických prvkov a v interakcii s koreňmi rastlín a pôdnych častíc . Aj v malej vzorke pôdy , ako je tá obsiahnutá v lyžice , existujú milióny jednotlivých prítomných baktérií . Úlohou v izolácii jednotlivých baktérií je zriediť vzorku pôdy , aby sa bakteriálna koncentrácia natoľko nízka , že jediná baktérie môžu byť oddelené od ostatných a môžu rásť do čistej kolónie na živnom agare . Veci , ktoré budete potrebovať
sójový bujón Trypticase
5 ml skúmavky , sterilizované a limitovaný
Sterilné drevené zmrzlinu palice
Wax značenie ceruzka
Stojan na skúmavky
Papierové uteráky
Bleach ( 10 percent roztok )
Bunsen horák
Zápasy klipart inokuláciou slučka
Trypticase sójovom agare
Petri dosiek
inkubátora
Chladnička
Zobraziť ďalšie inštrukcie
vzorka pôdy
1 Skúmavky sú určené na riedenie vzoriek pôdy .

zrušil korkový sterilná skúmavka containg 5 ml živnej Trypticase Soy bujón . Vyberte si sterilný zmrzlinu tyč .
2. Použite sterilný zmrzlinu palicu zbierať pôdy .

Choďte von a zbierať malú vzorku pôdy sa špičkou Zmrzlinu palice , za použitia sterilné techniky , metódy zaistenia vzorka nie je kontaminovaný , a užívateľ nie je infikovaný .
3

zakryli , potom ju do skúmavky a pôdu do živného média v skúmavke . Mix pôdu do vývaru s Zmrzlinu palicou . Zakryte skúmavky s viečkom . Napíšte dátum a kolekcie kolekcie umiestnenie na strane skúmavky pomocou vosku označenie ceruzku .
4

vložte skúmavku do stojana skúmavky po dobu asi 30 minút , aby pôda usadiť na dno .
Naočkujte Petri Dish
5

dezinfikujte pracovnú plochu čistením ho 10 percent bielidlá riešení a papierové uteráky .
6

Otočte Petriho misku tak , aby spodné viečko obsahujúce agar je hore . Nakreslite T na dolnom viečku , s brvno T oddelí hornej tretine veka a na stonke T oddeľujúce spodné dve tretiny na polovicu .
7 Použitie Bunsen horák plameňa očká .

Zapnutie a svetlo Bunsen horák . Flame očkovanie slučku nad plameňom horáka Bunsenova .
8

zakryli , potom ju skúmavky a dotknúť slučku do hornej vrstvy jasnejšie kvapaliny . Vytiahnite slučky a znovu skúmavku .
Metóda T - Streak
9 Skontrolujte , kľukatý pruh cez jednu tretinu misky .

Pomocou priečka T nakreslené na zadnej strane spodného veka ako referenčný bod . Stlačte inokulačnému slučku na jednej strane priestoru nad T brvno a čerpať špičku po povrchu agaru v kľukatá čiara , ktorá končí na líniu na opačnej strane priestoru .
10

odstráňte inokuláciou slučka a zatvorte Petriho misku . Plameň slučku v Bunsenovým horáka a nechajte ho krátko vychladnúť . Otvorte Petriho misku a dotknúť slučky jednom mieste v blízkosti samého konca riadku už natiahnutý slučky . Iný cikcak linke v pravých uhloch k prvej línii , vzťahujúce sa na prvé miesto v rámci T brvno a na jednej strane stonke .
11.

Odstráňte slučku a zatvorte Petriho misku . Opäť plameň slučku , otvorte Petriho misku , a dotknite sa mierne chladené slučku na druhom riadku u konca . Nakreslite ďalšie kľukatú čiaru kolmo na druhý riadok v zostávajúcej voľné miesto na Petriho miske .
12

Zatvorte Petriho misku po vytiahnutí slučky . Plameň slučku a odložte ho nabok . Vypnite Bunsen horák .
Stredná Kultúra
13 Vyberte jednu kolóniu ďalej izolovať baktérie .

Dajte Petriho misky do inkubátora na 30 stupňov Celzia po dobu 48 hodín . Vezmite ju von a preskúmať agar pre rast bakteriálnych kolónií . Vyberte si kolónie , ktorá vyzerá uniformu a diskrétne v celkovom vzhľade , čo je známkou toho , že kolónie vznikli iba z jednej baktérie . Kruh umiestnenie kolónie na zadnej strane spodného veka s označením ceruzkou .
14

Flame inokuláciou slučka . Otvorte Petriho misku a dotknúť sa mierne ochladí slučku do stredu kolónie .
15

Opakujte kroky pre výrobu T - sériu na novú Petriho misky s agarom v spodnej viečko . Je-li pruh vyrobený a Petriho misky sa uzavrie , zapisovať dátum a vzorku pôdy inokulum odfotil z na spodnej strane spodného veka . Vypnite Bunsen horák .
16

inkubujte Petriho misky na 30 stupňov Celzia po dobu 48 hodín . Skontrolujte kolónie , ktoré rástli na agare , hľadá jednotnosti farby , tvaru a textúry . Opakujte sekundárne kultúry konania, ak existujú nejaké kolónie , ktoré sa líšia výrazne vo vzhľade od ostatných , čo znamená , že jediné baktérie nebol izolovaný .
17 Rovnaké vyzerajúce kolónie ukazujú bakteriálne izoláciu .

mraziť agarom , ktorý obsahuje rovnaké vyzerajúce kolónie na tom , s uniformita je dobré znamenie , že iba jediná baktérie bol izolovaný zo vzorky pôdy .
18

Vykonajte ďalšie testy identifikácia izolovaných baktérií v prípade potreby , ako je gram škvŕn , mikroskopické vyšetrenie a kultúry na rôznych druhoch agare .